《水質 石油類的測定 熒光分光光度法》（征求意見稿）

《水質 石油類的測定 熒光分光光度法》（征求意見稿）
Waterquality-Determinationofpetroleumoils-Fluorescencespectrophotometricmethod
 
前 言
為貫徹《中華人民共和國環境保護法》、《中華人民共和國水污染防治法》和《中華人民共和國海洋環境保護法》，保護環境，保障人體健康，規范水中石油類的測定方法，制定本標準。
本標準規定了測定水中石油類的熒光分光光度法。
本標準為發布。
本標準由環境監測司、科技標準司組織制訂。
本標準主要起草單位：天津市生態環境監測中心、環境保護部環境標準研究所。
本標準驗證單位：北京華測檢測技術有限公司、國家海洋局天津海水淡化與綜合利用研究所、河北省秦皇島環境監測中心、海南省環境監測中心站、廣西壯族自治區海洋環境監測中心站、浙江省舟山海洋生態環境監測站。
本標準生態環境部20□□年□□月□□日批準。
本標準自20□□年□□月□□日起實施。
本標準由生態環境部解釋。
【生態環境部 發布】
 
水質石油類的測定熒光分光光度法警告：實驗中所使用的正己烷具有一定毒性，應在通風櫥中進行操作，同時按規定佩戴防護器具，避免接觸皮膚和衣服。
1. 適用范圍
本標準規定了測定水中石油類的熒光分光光度法。
本標準適用于地表水、地下水和海水中石油類的測定。
當取樣體積為500ml，萃取液體積為25ml，使用1cm比色皿時，方法檢出限為0.005mg/L，測定下限為0.020mg/L。
2. 規范性引用文件
本標準內容引用了下列文件或其中的條款。凡是未注明日期的引用文件，其有效版本適
用于本標準。
HJ493 水質樣品的保存和管理技術規定
HJ/T91 地表水和污水監測技術規范
HJ/T164 地下水環境監測技術規范
GB17378.3 海洋監測規范第3部分：樣品采集、貯存與運輸
3. 術語和定義
下列術語和定義適用于本標準。
石油類petroleum oils
指在pH≤2的條件下，能被正己烷萃取不被硅酸鎂吸附，且在激發波長為310nm，發射波長為360nm處有熒光響應的物質。
4. 方法原理
在pH≤2的條件下，用正己烷萃取樣品中的油類物質，經無水硫酸鈉脫水后，再用硅酸鎂吸附除去動植物油類等極性物質，其中的石油類物質經激發光源照射，分子產生躍遷，當分子從激發態返回到基態的振動能級時，以熒光形式釋放吸收的能量發出分子熒光。熒光強度在一定濃度范圍內與石油類含量成正比。
5. 試劑和材料
除非另有說明，分析時均使用符合國家標準的分析純試劑，實驗用水為蒸餾水或去離子水。
5.1鹽酸：ρ（HCl）=1.19g/ml。
5.2正己烷（C₆H₁₄），色譜純。
5.3無水乙醇（C₂H₆O）。
5.4無水硫酸鈉（Na₂SO₄）。
于550℃下灼燒4h，冷卻后裝入磨口玻璃瓶中，置于干燥器內貯存。
5.5硅酸鎂（MgSiO₃）：60目~100目。
于550℃下灼燒4h，冷卻后稱取適量硅酸鎂于磨口玻璃瓶中，根據硅酸鎂的重量，按6%（m/m）的比例加入適量蒸餾水，密塞并充分振蕩數分鐘，放置12h，備用。
5.6石油類標準貯備液：ρ=1000mg/L。
直接購買市售正己烷體系適用于熒光分光光度法測定的有證標準物質。
5.7石油類標準使用液：ρ=100mg/L。
吸取10.00ml石油類標準貯備液（5.6）于100ml容量瓶中，用正己烷（5.2）定容，搖勻，臨用現配。
5.8玻璃棉。
用正己烷（5.2）浸洗并晾干，置于干燥玻璃瓶中，備用。
5.9硅酸鎂吸附柱。
將內徑10mm、長約200mm的玻璃層析柱出口處填塞少量玻璃棉（5.8），再將硅酸鎂（5.5）緩緩倒入玻璃層析柱中，邊倒邊輕輕敲打，填充高度約為80mm。
6. 儀器和設備
6.1采樣瓶：500ml棕色硬質玻璃瓶。
6.2熒光分光光度計：激發波長250～700nm；發射波長250～700nm。
6.3比色皿：1cm石英熒光比色皿。
6.4分液漏斗：1000ml，聚四氟乙烯旋塞。
6.5錐形瓶：50ml，具塞磨口。
6.6水平振蕩器。
6.7離心機：配備玻璃離心管。
6.8一般實驗室常用器皿和設備。
7. 樣品
7.1樣品的采集
參照HJ/T91、HJ/T164和GB17378.3的相關規定進行樣品的采集。用采樣瓶（6.1）采集樣品。樣品采集好后，加入鹽酸（5.1）酸化至pH≤2。
7.2樣品的保存
參照HJ493和GB17378.3的相關規定進行樣品保存，如樣品不能在24h內測定，應在5℃以下冷藏保存，7d內測定。
7.3試樣的制備
7.3.1萃取
將樣品全部轉移至1000ml分液漏斗（6.4）中，量取25.0ml正己烷（5.2）洗滌樣品瓶后，全部轉移至分液漏斗中。充分振搖2min，期間經常開啟旋塞排氣，靜置分層后，將下層水相全部轉移至1000ml量筒中，測量樣品體積并記錄。
注1：乳化程度較重時，可向除去水相后的萃取液中滴加適量無水乙醇（5.3）破乳，若效果仍不理想，可將其轉移至玻璃離心管中，轉速2000r/min離心3min。
注2：可采用自動萃取裝置代替手動萃取。
7.3.2脫水
將萃取液（7.3.1）轉移至已加入3g無水硫酸鈉（5.4）的錐形瓶（6.5）中，蓋緊瓶塞，振搖數次，靜置。若無水硫酸鈉（5.4）全部結塊，需補加無水硫酸鈉（5.4）直至不再結塊。
7.3.3吸附
繼續向萃取液（7.3.2）中加入3g硅酸鎂（5.5），置于水平振蕩器（6.6）上，振蕩20min，靜置沉淀。在玻璃漏斗底部墊上少量玻璃棉（5.8），過濾，待測。
注：也可采用硅酸鎂吸附柱（5.9）進行吸附。將萃取液（7.3.2）通過硅酸鎂吸附柱（5.9），棄去前2~3ml濾液，待測。
7.4空白試樣的制備
以實驗用水代替樣品，按照試樣的制備步驟（7.3）制備空白試樣。
8. 分析步驟
8.1標準曲線的建立
準確移取0.00ml、0.10ml、0.50ml、1.00ml、5.00ml和10.00ml石油類標準使用液（5.7）于6個50ml容量瓶中，用正己烷（5.2）稀釋至標線，搖勻。標準系列濃度分別為0.00mg/L、0.20mg/L、1.00mg/L、2.00mg/L、10.0mg/L和20.0mg/L。在激發波長為310nm，發射波長為360nm條件下，使用1cm石英熒光比色皿（6.3），以正己烷（5.2）作參比，測量熒光強度。以石油類濃度（mg/L）為橫坐標，以熒光強度為縱坐標，建立標準曲線。
注：儀器參數按照儀器說明書推薦值進行設置。
8.2試樣的測定
按照標準曲線的建立（8.1）相同步驟進行試樣（7.3）的測定。
注：當試樣熒光強度大于曲線高點時，用正己烷（5.2）稀釋試樣，再經硅酸鎂（5.5）吸附后測定。
8.3空白試樣的測定
按照分析步驟（8.2）進行空白試樣（7.4）的測定。
9. 結果計算與表示
9.1結果計算
水中石油類的質量濃度ρ（mg/L）按照公式（1）計算：
 
公式(1)：ρ=(A-A₀-a)×V₁÷(b×V)    
式中：ρ——水中石油類的質量濃度，mg/L；
A——試樣的熒光強度；
A₀——空白試樣的熒光強度；
a——標準曲線的截距；
V₁——萃取液體積，ml；
b——標準曲線的斜率；
V——水樣體積，ml。
9.2結果表示
結果保留小數位數與檢出限一致，多保留三位有效數字。
10. 精密度和準確度
10.1精密度
六家實驗室分別對配制濃度為0.050mg/L、0.100mg/L、0.200mg/L和1.00mg/L的統一樣品進行測定，實驗室內相對標準偏差范圍分別為：2.7%～7.7%、1.3%～8.9%、1.3%～5.3%、0.3%～3.9%；實驗室間相對標準偏差分別為：7.9%、3.7%、2.4%和8.0%；重復性限分別為：0.007mg/L、0.013mg/L、0.014mg/L和0.061mg/L；再現性限分別為：0.013mg/L、0.015mg/L、0.018mg/L和0.223mg/L。
11. 質量保證和質量控制
11.1空白試驗
每批樣品應至少做一個空白，測試結果應低于方法檢出限。
11.2標準曲線
標準曲線回歸方程的相關系數應≥0.999。
11.3準確度
每批樣品至少分析一個質控樣品，測定結果應在給定的保證值范圍內。
12. 廢物處理
實驗過程中產生的廢液和廢物應分類收集并委托具有資質的單位處置。
13. 注意事項
13.1石英熒光比色皿壁上的沾污會影響測定結果。每次使用前，應檢查石英熒光比色皿的
潔凈度。
13.2樣品與空白試樣制備所使用的正己烷應為同一批號。